测定缓冲液含量的方法很多，其中电位滴定法是一种简单、快速的方法。强酸和强碱都是强电解质，在水溶液中完全电离，可以通过酸碱滴定直接完成。但是，生物缓冲液如CAPS、Bicine、武汉HEPES等。

　　为什么缓冲液需要电位滴定

　　缓冲液是具有两性性质的弱酸弱碱，不能像溶液中的强电解质那样完全电离。而且它们可以缓冲滴定过程中的pH变化，指示剂颜色突变不明显，很难判断滴定终点。该检测方法适用于反应平衡常数小、滴定突跳不明显、显色试剂和混浊试剂。

　　电位滴定用缓冲试剂

　　大多数缓冲区，如CAPS、Bicine、HEPES等。，是有机弱酸(Tris除外)，可以用氢氧化钠标准溶液(强电解质)滴定，有的用碳酸钠滴定，但它是弱电解质。可以用浓度或含量恒定的缓冲液，如CAPS标准溶液，用NaOH电位滴定法做标准曲线，然后就可以测量未知浓度的CAPS。

　　缓冲液在溶液中部分解离，解离度可以通过平衡常数和加入溶液中的弱酸和强酸的量来计算。公式为pH = pKa+对数([A]/[HA])，其中pKa为该实验温度下缓冲液的解离常数，[A]/[HA]为解离度，以CAPS为例，表示为CAPS阴离子与CAPS分子的比值。该方程在弱酸滴定的缓冲区非常有用，在一定溶液的离子强度下，pKa为-logKa。

　　需要注意的是，NAOH溶液是强碱，有很强的腐蚀作用，所以可以避免接触手或衣服，会腐蚀玻璃，所以玻璃仪器要及时清洗。其他缓冲区可能有多个跳转点。例如PIPES中的两个乙磺酸基团不是一元酸，CAPS中的丙磺酸基团反应后，持续滴加NaOH可能与CAPS上的氨基发生反应，改变电位。

　　除电位滴定法外，缓冲液常采用液相色谱法测定，如德胜生产的Tris缓冲液，其主要含量在实验室用HPLC测定。当然，不同的测定方法各有优势，不同的检测方法可以测定不同的缓冲液。