武汉异硫氰酸胍

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蛋白酶K在核酸提取中的应用

信息来源: http://www.hbjxdgc.com/ 作者:湖北玖丰隆化工有限公司 发布时间:2021-09-07 09:21

  武汉蛋白酶k是一种从白色念珠菌分离出来的蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂。在DNA提取中,主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白作为一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,使DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行抽提,除去杂质,收集DNA。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力。


  蛋白酶K可用于各种蛋白质的消化,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K在提取核酸中的应用涉及到食源性疾病预防、农业病虫害的防治、法医学基因鉴定比对和分子生物学试验研究等多个领域。应用对象包括原核生物、人体血样及组织、动植物组织、寄生虫、微生物等类别。


  对于DNA提取现有的方法主要是CTAB方法,此外还可以采用不同的方法,如玻璃珠法、研磨法、冻融法等物理方式,异硫氰酸胍法、碱裂解法等化学方式,酶法等生物方式。


  提取质量各有不同,还不能完全满足使用需求。通过调节蛋白酶K的消化时长,可以很好地优化DNA的提取,提高DNA的提取质量,保证DNA提取具有较高的纯度,同时DNA自身也没有受到损坏。

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